臺中市市售禽畜肉品中動物用藥-乙型受體素殘留量調查

 林美華 黃莉芬 高瑜璠 徐佩鈴 林宛蓁
臺中市政府衛生局

摘要
有關美國進口牛肉含乙型受體素的話題不斷延燒，已造成廣大消費者恐慌，為了消弭民眾食的疑慮，本局於本（101）年2月17日起展開肉品瘦肉精體檢，截至4月25日止共抽驗233件檢體，其中牛肉166件（71.2％）、豬肉56件（24.0％）、鴨鵝肉6件（2.6％）及雞肉5件（2.1％）。依據100 年 4 月 7 日署授食字第 1001900952 號公告修正之「食品中動物用藥殘留量檢驗方法－乙型受體素類多重殘留分析」針對clenbuterol、salbutamol、terbutaline、ractopamine、zilpaterol、cimaterol及tulobuterol等7種乙型受體素進行檢驗。結果共有227件（97.4％）未檢出，6件（2.6％）檢出，檢出之檢體種類均為牛肉，檢出之乙型受體素為ractopamine，檢出數值之範圍為0.5至11.5ppb。依據行政院衛生署公告之「動物用藥殘留標準」，肉品中皆不得檢出乙型受體素，所以檢出者均已依食品衛生管理法處辦，保障民眾食在安心的權益。
前言
瘦肉精是「β-受體促進劑（β- agonist）」的一般俗稱，學名是「腎上腺乙型接受體作用劑」，是一種類交感神經興奮劑。包括Ractopamine（萊克多巴胺）、Salbutamol（沙丁胺醇）、Terbutaline（特必林）、Clenbuterol（克倫特羅）等，大約有二十種左右。由於具有促進蛋白質的合成，增加飼料轉換率，讓動物多長肉、少長脂肪以增加賣相，獲取更高利潤，所以又名瘦肉精。直接食入過量的萊克多巴胺會產生噁心、肌肉顫抖、血壓上升、心悸、無力感及頭暈等症狀。然而，相關人體試驗證實，萊克多巴胺在人體會快速代謝並排出體外，是一種毒性低、代謝快速又無累積性的動物用藥，所以目前有許多（26個）國家地區核准於飼料中添加萊克多巴胺，以便獲取更高利潤，但在我國，行政院農業委員會仍公告禁止使用，亦即不得檢出。為了掌握各類肉品瘦肉精的殘留情形，本局於本（101）年2月17日起展開肉品瘦肉精體檢，共同維護民眾食在安心的權益。 
材料與方法
一、材料
  （一）檢體來源：於本（101）年2月17日起展開肉品瘦肉精體檢，截至4月25日止一共抽驗231件檢體，其中包含166件牛肉（71.9％）、54件豬肉（23.4％）、7件鴨鵝肉（3.0％）及4件雞肉（1.7％）。
  （二）試藥：甲醇、乙腈及異丙醇均採用液相層析級；醋酸鈉、醋酸銨、氫氧化鈉及醋酸均採用試藥特級；去離子水(電阻係數可達18 MΩ.cm以上)；β-葡萄糖醛酸苷酶溶液(含β-glucuronidase 98000 unit/mL及ulfatase 2400 unit/mL)；clenbuterol hydrochloride、salbutamol、terbutaline hemisulfate、ractopamine hydrochloride、zilpaterol、cimaterol及tulobuterol對照用標準品；clenbuterol-d₉ hydrochloride、albutamol-d₆、terbutaline-d₉、ractopamine-d₆ hydrochloride、zilpaterol-d₇及cimaterol-d₉同位素內部標準品。
  （三）儀器：
1.液相層析串聯質譜儀：
  離子源：電灑離子化正離子(positive ion electrospray ionization, ESI^＋)。
  層析管：Polaris Si-A，3μm，內徑2.0 mm × 5 cm，或同級品。
2.均質機(Homogenizer)。
3.水浴(Water bath)：能維持水溫溫差在1℃以內者。
4.離心機(Centrifuge)：轉速可達4000 rpm以上者。
5.振盪器(Shaker)。
6.pH測定儀(pH meter)。
7.固相真空萃取裝置(Solid phase extraction vacuum manifolds)。
8.旋渦混合器(Vortex mixer)。
  （四）相關耗材：
1.離心管：50 mL，PP材質。
2.固相萃取匣(Solid phase extraction cartridge)：Oasis HLB, 200 mg, 6 mL，或同級品。
3.濾膜：孔徑0.22μm，Nylon材質。 
二、實驗方法-依據100 年 4 月 7 日署授食字第 1001900952 號公告修正之「食品中動物用藥殘留量檢驗方法－乙型受體素類多重殘留分析」針對clenbuterol、salbutamol、terbutaline、ractopamine、zilpaterol、cimaterol及tulobuterol等7種乙型受體素進行檢驗。
（一）標準溶液之配製：
  1.內部標準溶液：取相當於含lenbuterol-d₉、salbutamol-d₆、terbutaline-d₉、ractopamine-d₆、zilpaterol-d₇及cimaterol-d₉各約5 mg之同位素內部標準品，精確稱定，分別以甲醇溶解並定容至50 mL，作為內部標準原液。使用時，分別取適量內部標準原液混合後，以乙腈：7 mM醋酸銨(8:2, v/v)溶液稀釋至100 ng/mL，作為內部標準溶液。
    2.標準溶液：取相當於含clenbuterol、salbutamol、terbutaline、ractopamine、zilpaterol、cimaterol及tulobuterol各約5 mg之對照用標準品，精確稱定，分別以甲醇溶解並定容至50 mL，作為標準原液。使用時，分別取適量標準原液混合後，以乙腈：7 mM醋酸銨(8:2, v/v)溶液稀釋至100 ng/mL，作為混合標準原液。臨用時取適量混合標準原液及內部標準溶液，以乙腈：7 mM醋酸銨(8:2, v/v)溶液稀釋至1.5~50 ng/mL (含內部標準品濃度10 ng/mL)，作為標準溶液。
（二）檢液之調製：
    1.萃取：將檢體細切，以均質機均質後，取檢體約5 g，精確稱定，置於均質機中，加入0.2 M醋酸鈉緩衝溶液15 mL，攪拌均質2分鐘後，移入離心管中，加入內部標準溶液及β-葡萄糖醛酸苷酶溶液各100μL，混合均勻，置於37℃水浴中水解1小時。於4000 rpm離心10分鐘，收集上清液，離心管中之沈澱物再加入0.2 M醋酸鈉緩衝溶液 15 mL，振盪萃取10分鐘，於4000 rpm離心10分鐘。合併上清液，以1 N氫氧化鈉溶液調整pH值為7.0，再於4000 rpm離心10分鐘，取上清液供淨化用。
    2.淨化：取2.7.1節供淨化用之溶液，注入預先以甲醇3 mL及去離子水3 mL潤洗之固相萃取匣，以去離子水4 mL清洗固相萃取匣，棄流出液。以甲醇4 mL沖提，收集沖提液，於65℃以氮氣吹乾，殘留物加乙腈：7 mM醋酸銨(8:2, v/v)溶液1 mL，以旋渦混合器振盪溶解，經濾膜過濾後，供作檢液。
（三）液相層析串聯質譜測定條件：
注入量：10μL。
移動相流速：0.2 mL/min。
毛細管電壓(Capillary voltage)：3.4 kV。
離子源溫度(Ion source temperature)：120℃
溶媒揮散溫度(Desolvation temperature)：450℃。
進樣錐氣體流速(Cone gas flow rate)：50 L/hr。
溶煤揮散流速(Desolvation flow rate)：600 L/hr。
偵測模式：多重反應偵測(multiple reaction monitoring, MRM)。
結果與討論
    本案共抽驗檢體233件，其中牛肉166件（71.2％）、豬肉56件（24.0％）、鴨鵝肉6件（2.6％）及雞肉5件（2.1％），僅6件牛肉檢出乙型受體素，其餘肉品均未檢出（圖1）。探討本案檢體來源，發現豬肉、鴨鵝肉及雞肉主要來自國內農場，牛肉則多仰賴進口，166件檢體中僅2件產自台灣，而由國外進口之牛肉中，產地來源以澳洲69件最多，紐西蘭50件居次，美國29件，巴拿馬1件，另有15件產地不明，6件檢出乙型受體素之牛肉，除1件未知來源外，其餘5件均來自美國（圖2）。本案乃針對clenbuterol、salbutamol、terbutaline、ractopamine、zilpaterol、cimaterol及tulobuterol等7種乙型受體素進行檢驗，結果共有227件（97.4％）未檢出，6件（2.6％）檢出，檢出者均為ractopamine，檢出數值之範圍為0.5至11.5 ppb（圖3、4）。顯示部分美國農戶飼育肉牛有使用乙型受體素之現象，且使用之乙型受體素為毒性相對較低的ractopamine。檢出ractopamine之檢體其檢測值除1件超過各國訂定之動物用藥殘留容許量（Maximum Residue Limit,MRL）最低值10 ppb，其餘均低於10 ppb（表1）。本案另輔以萊克多巴胺快速篩檢試驗（試劑套組由台灣尖端先進生技醫藥股份有限公司提供）（圖5），共檢驗121件，其中119件與公告方法結果相符，但有2件出現疑似偽陽性之現象，且於檢測時發現，結果判讀易出現人為差異，建議檢驗仍應以公告方法之結果為判斷依據。目前，行政院衛生署已修訂「動物用藥殘留標準」，規定牛肉中的萊克多巴胺容許量為10 ppb以下，牛肉原產地強制標示的配套措施，如果業者沒有遵守規定標示，可以罰3到15萬元罰緩，標示不實最高可罰到20萬元。 
圖1.各類肉品乙型受體素檢出情形（件）
圖2.各產地牛肉檢體乙型受體素檢出情形（件） 
圖3.各種乙型受體素之檢出率（％） 
圖4.陽性檢體ractopamine檢出數值（ppb） 
表1.國際間萊克多巴胺之MRL動物用藥品殘留容許量（Maximum Residue Limit,MRL）

註1：單位：ppb
註2：表中所示「-」，表示該國目前未訂有該類產品之標準。至於各國核准使用萊克多巴胺狀況，已知有26國(地區)核准使用於豬，4國核准使用於牛，2國核准使用於火雞
註3：食品標準委員會（或食品法典委員會，Codex Alimentarius Commission, 簡稱CAC）是由聯合國國際糧農組織（FAO）和世界衛生組織（WHO）於1963年共同成立，宗旨為制定食品安全相關標準
圖5.萊克多巴胺快速檢測試劑套組